Quantification moléculaire de la densité et de l'oligomérisation

La spectroscopie de Fluctuation de Fluorescence (FFS) est une famille de techniques qui tire profit des propriétés des fluctuations statistiques. Grâce à la collaboration entre le LIPhy et l'équipe du CEA, BRM, nous avons pu développer des substrats bien contrôlés pour des études cellulaires et, en combinant la FFS avec le photoblanchiment, fournir une estimation fiable du nombre de molécules. En particulier, nous avons développé une plateforme à base de streptavidine (SAv) sur laquelle différentes molécules biotinylées peuvent être greffées. La monocouche SAv a été caractérisée par FFS mais les molécules biotinylées restantes n'ont pas été quantifiées. Nous voulons maintenant faire un pas de plus en abordant des biomatériaux plus complexes pour des études cellulaires où la connaissance de la quantité de molécule est fondamentale. La même technique (appelée pbFFS pour photobleaching Fluctuation Fluorescence Spectroscopy) peut également être appliquée à l'oligomérisation, au regroupement ou à l'agrégation, qui sont les médiateurs d'une myriade de processus biochimiques. Par exemple, dans la signalisation cellulaire, la même molécule peut moduler son affinité avec ses partenaires et activer une réponse cellulaire différente selon qu'elle est à l'état monomère ou oligomère.